
Vena8内皮+生物芯片:用于细胞原级内皮细胞研究及模拟生理流动炒股杠杆配资
介绍
Vena8内皮+生物芯片包含8个平行封闭微细血管,用于培养原级内皮细胞和基于连续流细胞的检测。对原级内皮细胞进行培养,随后可通过Cellix的微流控泵注入细胞悬浮液,该泵支持多种剪切应力/剪切流速,用于动态流量检测。Vena8 内皮+生物芯片以10枚一组供应,每包可完成80次实验。
Vena8 内皮+功能
展开剩余78% 20倍、40倍、60倍、100倍短工作距离放大显微镜;60倍,100倍油浸显微镜。 更宽的通道便于细胞播种。 3小时内获得原级内皮细胞单层。 兼容明场/相位差/荧光/共聚焦显微镜。 适合培养多种原级内皮细胞。 适合全血和血细胞分析(如白细胞、血小板) 生物芯片塑料具有光学透明性,允许进行详细的显微镜研究。 0.05–200 dyne/cm²剪切应力/剪切流速,易于获得和控制 通过Mirus Evo纳米泵、ExiGo、UniGo和4U微流控泵。 剪切应力/剪切流速可以预设为在 测定。 在流动条件下进行实时成像。应用
剪切流实验中内皮细胞单层细胞培养。 细胞间粘附剪切流分析,用于以下研究: 心血管/动脉粥样硬化:单核细胞原发性粘连冠状动脉内皮细胞。 炎症:THP-1单核细胞在流动时粘连HUVECs。 哮喘/慢性阻塞性肺病(COPD):嗜酸性粒细胞对人体肺部微血管内皮细胞(HMVEC-L)的粘连研究。 肿瘤学 - 乳腺癌:MDA细胞在剪切流下附着于TNFα刺激的HUVECs。性能与技术规格
*考虑粘度为4.5 cP的人类全血。
**以蒸馏水在微毛细管中流动为:400微米(宽)×100微米(深)×28毫米(长)为单位。
Vena8内皮+生物芯片,协议#1:Vena8内皮+生物芯片中的涂层与细胞播种
第一步
Cellix Vena8 内皮+生物芯片使用标准黄色吸头移液器包覆,向每个微通道注入约12微升蛋白质(如纤维内维系素,100 μg/mL)。注意入口和出口端口上的液体过量。
第二步
随后将Vena8内皮+生物芯片放入加湿箱中,箱内保持开启1至1.5小时。或者,生物芯片可置于4°C进行过夜涂层。
第三步
潜伏期结束后,轻柔地向每个通道中加入5微升、1.5 x 106 / 100 μL(≅15 x 106/mL)内皮细胞。
注:指定浓度为初级HUVEC。
生物芯片在二氧化碳培养箱中保存15–20分钟,让细胞粘附。用显微镜观察生物芯片,并用50微升培养基补充所有储存槽。将生物芯片在CO2培养箱中保存1.5–2小时。
Vena8 内皮+生物芯片协议#2:在剪切流下使用Vena8内皮+生物芯片执行细胞滚动、粘附和迁移测试(手动版本——非VenaFlux平台)
第一步
悬浮细胞(如T细胞、单核细胞、血小板)会以适当浓度(通常为2–5 x 106/mL)重新悬浮在培养基中,置于Eppendorf管中。
第二步
使用Cellix Mirus Evo纳米泵或ExiGo泵,泵输出电缆可输出10微升介质。随后,输出电缆插入Vena8内皮+生物芯片的指定通道。
第三步
然后使用Cellix Mirus Evo纳米泵或ExiGo泵,以40 dynes/cm²的剪切应力注入40微升培养基。这样做是为了清洗通道中的细胞碎片。废物通过移液器从Vena8内皮+生物芯片的微孔中抽取。
步骤4
细胞样本被放入Vena8内皮+生物芯片上的该通道微孔中。
第五步
通过在FlowAssay软件中指定所需的剪切应力,将单元引入通道。流量将自动计算。
第六步
在每个剪切应力值下,建议沿通道长度拍摄3至5个视场的细胞滚动和粘附图像。
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